时隔3年后，韩春雨发布最新成果论文

时隔3年，曾处于舆论水滴的韩风雨公开了一项最原先分析成果。近日，韩风雨在可不印行网站BioRxiv上出版了一篇关于基因编辑的原先社论：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。社论共有5名所作，依次为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，实习单位均为河南科技产业所大学基因编辑分析中会心。其中会，韩风雨为无线通讯所作。据了解，学术著作中会提到的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR复合物的核反应心化学成分，它通过混合特定的分枝内侧一区域单独处理pre-crRNA，称为 CasE Binding S，原称为CBS。CasE保守His20参与特异性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则耗尽了特异性，但仍然与其靶标紧密混合。在该分析中会，通过将 split 白光与dCasE的N一端和C-末一端（ΔHis20）交融，框架了来生体RNA工具箱VN-dCasE-VC。该子系统仅仅在依赖于靶RNA时才送达白光，从而增强信噪比。在来生线粒体中会顺利进行图形的RNA，不必须特定的亚线粒体分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T线粒体中会的高水平表示和均匀分布表明CasE和dCasE适合于于来生线粒体中会的RNA加载。为了次测试CasE在哺乳类线粒体中会表示时是否具有强来生性，所作框架了“重原先启动”报告基因细胞核反应CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中会的GFP mRNA和CasE混合基因座（CBS）构成。当CasE被引入子系统时，GFP表示水平飙升。同时，为了进一步次测试CasE来生性，所作还框架了“启动时”报告基因细胞核反应RED-16×CBS-Lin28-C1，其中会CBS插入RED小分子基因的3′-UTR一区和Lin28的下游。Lin28是RNA核反应保留讯号，在其3′-UTR中会具有lin28讯号的RED小分子mRNA却是不能翻译者成肽质。CBS-CasE依赖限制性切断lin28讯号并从核反应释放靶mRNA用于翻译者（图1E和图1F）。这些表明CasE可以混合并研磨哺乳类线粒体中会的CBS。另外，为了将dCasE-CBS相互作用设计到RNA子系统中会，所作通过将split-FP5-7与dCasE肽混合。找到一个版，即VN-dCasE-VC较难送达白光，这可能是由于不错误的折叠或不稳定的状态，但是当与靶RNA（CBS）混合时，可以在白光孔径下明确地捕获白光讯号，即使VN-dCasE-VC表示细胞核反应的转染剂量非常低。月里，所作使用VN-dCasE-VC子系统哺乳类线粒体中会过表示的β-肌动肽（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC子系统在线粒体质中会显示出强白光。此外还通过观察到，向靶mRNA添加更为多CBS可改善讯号，白光更为清晰，因此，可以通过增加CBS的数量来监测低金属量的mRNA。总的来说，韩风雨制作团队发明了一种原先RNA工具箱，将其命名为VN-dCasE-VC，该子系统只能来生线粒体中会没有背景的特定RNA，通过白光将其图形。目前为止已有两种来生线粒体RNA成像工具箱，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雨制作团队开发设计的dCasE子系统，成像效果由于MS2，而且，dCasE肽的反应性为22kDa，远小于Cas13a的130kDa，dCasE的小反应性更为容易递送至线粒体内，因此更为适合于用于来生线粒体的RNA。一位接近韩风雨的香港市民透露：“这短文是在此之前韩风雨实习的承传，目的都是开发设计基因编辑工具箱。”不过，相比较的是，该分析目前为止出版于可不印行网站，尚未经过理应审定，不能接受，有科研香港市民指出，亮相在未经理应审定的可不印行上，是为了赢取亮相权。“韩风雨下一步还会投正式期刊的。”前述香港市民推测。不告诉此次原先分析成果是否会其后给韩风雨带来关注，2016年5同年，《自然—生物系统设计》出版韩风雨制作团队原先基因编辑系统设计NgAgo，被媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事情节原型炒作而走红，此后半年，韩风雨自已及其所在所大学陆续赢取各类荣誉和大量经费资助，但亦有全国性多名基因编辑行业科学家发帖发声称检验结果难以段落，怀疑检验结果的真实性。2017年8同年，《自然—生物系统设计》出版原先书《是该信息说谎的时候了》社论，宣布撤回韩风雨制作团队于2016年5同年2日出版在该期刊的学术著作。2018年9同年，河南科技产业所大学发布公告，韩风雨制作团队不依赖于主观捏造。但依据有关明确规定，取消韩风雨所赢取的提名奖，终止韩风雨制作团队顾及的工程技术并交回名教授。韩风雨制作团队回应称，检验设计依赖于局限性、分析反复依赖于着不严谨的问题。有业界香港市民表示：“这波之后，NgAgo这个分析路径在欧美做得极慢。韩风雨他们的实习推展起来也比较困难，连学生也没有原先招。”